本書是由李衛(wèi)芳副教授主編中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社于2012年出版的《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實驗》教材的第2版,共有25個基礎(chǔ)性實驗和1個綜合性實驗。其內(nèi)容包括蛋白質(zhì)、核酸、酶、糖等生物大分子分離純化、分析和定量檢測的技術(shù)和方法,以及圍繞葡萄糖異構(gòu)酶GI的克隆、分離純化和酶活鑒定的綜合性實驗課程。隨著生物學(xué)發(fā)展的日新月異,新儀器、新技術(shù),新方法的不斷涌現(xiàn),本書在前版的基礎(chǔ)上,結(jié)合中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院實驗教學(xué)中心現(xiàn)有儀器,從實驗設(shè)計、實驗選材到實驗操作都進(jìn)行了修改調(diào)整,并增加了5個新的實驗。本教材編寫目的是供綜合性大學(xué)、師范大學(xué)、醫(yī)學(xué)院校及農(nóng)業(yè)院校等生物化學(xué)專業(yè)本科生、生物學(xué)系非生化專業(yè)研究生的實驗指導(dǎo)教材,也可供從事生物化學(xué)、分子生物學(xué)研究的研究人員參考。
李衛(wèi)芳,中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院副教授,博士,多年從事實驗教學(xué)工作。已出版主編教材《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實驗》。
前言
第pan>部分 基礎(chǔ)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實驗
實驗pan>蛋白質(zhì)的定量測定
實驗2核酸的定量測定
實驗3糖的定量測定
實驗4不同去污劑對紅細(xì)胞細(xì)胞膜的溶解作用比較·
實驗5凝膠過濾層析柱的裝填及柱效測定
實驗6葡聚糖凝膠柱層析
實驗7離子交換柱層析法分離蛋白質(zhì)·
實驗8硫酸銨沉淀法分離純化核酮糖-pan>,5-二磷酸羧化酶/加氧酶
實驗9聚丙烯酰胺凝膠電泳分離植物過氧化物酶同工酶(活染色法)
實驗10SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)的分子量
實驗1pan>等電聚焦電泳
實驗12雙向電泳
實驗13酶聯(lián)免疫吸附測定法
實驗14蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)
實驗15交聯(lián)法鑒定蛋白質(zhì)的聚集特
實驗16肌動蛋白的體外聚合和共沉降
實驗17用正交法測定幾種因素對酶活力的影響
實驗18酸磷酸酯酶動力學(xué)質(zhì)的分析
實驗19質(zhì)粒DNA的提取
實驗20質(zhì)粒DNA的酶切與電泳鑒定
實驗21 PCR基因擴增
實驗22DNA樣品的膠回收及連接
實驗23大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化
實驗24釀酒酵RNA的提取、純化與鑒定
實驗25 反轉(zhuǎn)錄PCR和實時熒光定量PCR
第2部分 綜合生物化學(xué)與分子生物學(xué)實驗
實驗26葡萄糖異構(gòu)酶(GI)基因的克隆、表達(dá)、純化與質(zhì)鑒定
第3部分生物化學(xué)與分子生物學(xué)實驗
實驗27液相層析法定量測定各種糖類物質(zhì)
實驗28熒光偏振法測定生物大分子間的相互作用
實驗29凝膠遷移實驗鑒定蛋白質(zhì)和核酸的相互作用
實驗30等溫滴定量熱法定量測定蛋白質(zhì)和配體間的相互作用
實驗3pan>微量熱泳動法定量分析生物分子間的相互作用
附錄
附錄pan>學(xué)生實驗守則
附錄2實驗室及防護(hù)知識
附錄3實驗室用水常識
附錄4玻璃器皿的洗滌和常用洗液的配制
附錄5常見市售酸堿的濃度
附錄6相對原子質(zhì)量表(200pan>)
附錄7硫酸銨飽和度常用表
附錄8常用分子量標(biāo)準(zhǔn)參照
附錄9常用核酸蛋白數(shù)據(jù)換算
附錄10常用培養(yǎng)基
附錄1pan>常用抗生素
附錄12緩沖液的配制
附錄13電泳相關(guān)的常用緩沖液的配制
附錄14層析填料的技術(shù)參數(shù)
附錄15分子生物學(xué)常用軟件