第一章　細胞生物學實驗技術/1
第一節(jié)　細胞培養(yǎng)基本技術/1
一、 細胞培養(yǎng)的定義及條件/1
二、 細胞培養(yǎng)原理/3
三、 細胞培養(yǎng)基本實驗技術/4
四、 細胞培養(yǎng)基本注意事項/5
五、 細胞培養(yǎng)常用資源/5
第二節(jié)　細胞周期和細胞增殖實驗技術/7
一、 細胞周期和細胞增殖實驗原理/7
二、 細胞周期、增殖實驗技術具體步驟/11
第三節(jié)　細胞凋亡檢測實驗技術/12
一、 根據凋亡形態(tài)學特征的檢測方法/12
二、 磷脂酰絲氨酸外翻分析（Annexin V法）/14
三、 線粒體膜勢能的檢測/14
四、 DNA片斷化檢測/15
五、 TUNEL法/16
六、 Caspase-3活性的檢測/17
七、 凋亡相關蛋白TFAR19蛋白的表達和細胞定位分析/17
八、 其他方法/18
第四節(jié)　細胞自噬檢測實驗技術/19
一、 概論/19
二、 細胞自噬檢測的實驗技術及原理/20
三、 注意事項/23
第五節(jié)　細胞衰老檢測實驗技術/23
一、 衰老細胞的特征/24
二、 細胞衰老的檢測/25
三、 檢測實驗方法/25
第六節(jié)　細胞運動及遷移檢測實驗技術/26
一、 細胞運動及遷移的概念及意義/26
二、 細胞運動和遷移的檢測技術及原理/27
三、 細胞運動及遷移代表性檢測方法的具體步驟/29
四、 細胞運動及遷移檢測方法的心得、關鍵步驟與注意事項/31
第七節(jié)　原代細胞分離與分選實驗技術/34
一、 原代細胞分離技術的歷史背景/34
二、 原代細胞的分離與分選/35
三、 原代細胞應用的發(fā)展現(xiàn)狀與展望/47
第八節(jié)　細胞融合實驗技術/48
一、 細胞融合實驗方法的原理/48
二、 細胞融合技術實驗方法（以制備雜交瘤細胞為例）/52
三、 細胞融合技術的注意事項及解決方案/53
第九節(jié)　亞細胞器的分離與鑒定實驗技術/54
一、 亞細胞組分分離的原理及研究意義/54
二、 亞細胞組分分離的實驗技術及鑒定/54
第二章　生理學實驗技術/63
第一節(jié)　神經電生理學實驗技術/63
一、 神經電信號的特征/63
二、 離體電生理實驗技術原理/65
三、 在體電生理記錄實驗技術原理/70
四、 神經電生理方法的比較與選擇/72
第二節(jié)　循環(huán)生理與病理生理實驗技術/75
一、 循環(huán)生理學檢測技術/75
二、 循環(huán)病理生理學實驗技術與方法/79
第三節(jié)　微循環(huán)生理與病理生理實驗技術/84
一、 活體微循環(huán)觀察/85
二、 淋巴微循環(huán)觀察與分析/87
三、 心肌、腦微血管內皮細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定/88
第四節(jié)　消化生理與病理生理實驗技術/89
一、 胃腸道動力學研究方法/89
二、 胃腸道吸收功能實驗/92
三、 胃腸道消化功能實驗/93
四、 消化道分泌功能/94
五、 消化道屏障功能研究方法/94
六、 膽汁淤積動物模型/95
第五節(jié)　內分泌與生殖生理學實驗技術/96
一、 內分泌生理學檢測技術/96
二、 生殖生理學檢測技術/99
第六節(jié)　腦高級功能檢測實驗技術/ 102
一、 腦功能成像技術/ 102
二、 行為學實驗技術/ 105
三、 神經環(huán)路追蹤和光遺傳學技術/ 108
第三章　生物化學（蛋白質）實驗技術/ 111
第一節(jié)　重組蛋白質表達技術/ 111
一、 重組蛋白質表達系統(tǒng)概述/ 112
二、 重組蛋白質表達策略選擇/ 113
三、 重組蛋白質表達問題分析/ 115
四、 重組蛋白質的規(guī)�；�制備/ 115
第二節(jié)　蛋白質的分離純化與鑒定技術/ 116
一、 重組蛋白質和天然蛋白質提取純化
方法的差異/ 117
二、 蛋白質的分離純化與鑒定技術/ 117
三、 蛋白質純度判斷/ 119
四、 純化蛋白質的鑒定/ 120
五、 蛋白質提取純化鑒定的策略/ 120
六、 蛋白質定量方法/ 121
第三節(jié)　蛋白質功能的研究方法/ 123
一、 蛋白質亞細胞定位/ 123
二、 蛋白質與蛋白質相互作用研究方法/ 125
三、 蛋白復合體的研究方法/ 128
四、 蛋白質-DNA 相互作用測定方法/ 128
第四節(jié)　蛋白質的空間結構分析與預測/ 130
一、 蛋白質的結構層次/ 130
二、 蛋白質的空間結構解析/ 130
三、 蛋白質的空間結構預測/ 134
第五節(jié)　合成生物學與蛋白質工程/ 135
一、 合成生物學/ 135
二、 蛋白質工程/ 137
第四章　醫(yī)學遺傳學實驗技術/ 143
第一節(jié)　染色體病的研究方法與技術/ 143
一、 染色體病概述/ 143
二、 染色體病實驗技術的原理與選擇/ 144
三、 無創(chuàng)性胎兒染色體非整倍體產前檢測技術/ 150
第二節(jié)　單基因病的研究方法與技術/ 152
一、 單基因病概述/ 152
二、 單基因病遺傳學實驗技術的原理與選擇/ 152
三、 NGS 技術在單基因遺傳病致病基因鑒定中的策略/ 158
第三節(jié)　基因組病的研究方法與技術/ 159
一、 基因組病概述/ 159
二、 基因組疾病遺傳學實驗技術的原理與選擇/ 161
第四節(jié)　復雜疾病的研究方法與技術/ 165
一、 復雜疾病概述/ 165
二、 復雜疾病遺傳學實驗技術的原理與選擇/ 166
第五節(jié)　遺傳病的診斷/ 172
一、 產前診斷技術的原理與選擇/ 172
二、 遺傳病基因診斷技術的原理與選擇/ 175
第六節(jié)　遺傳多態(tài)性的檢測/ 178
一、 遺傳多態(tài)性概述/ 178
二、 遺傳多態(tài)性檢測技術的原理與選擇/ 179
三、 總結/ 182
第五章　分子克隆實驗技術/ 184
第一節(jié)　分子生物學基本技術/ 184
一、 大腸桿菌、質粒和噬菌體/ 184
二、 核酸的分離與純化/ 187
三、 核酸的鑒定與分析/ 189
第二節(jié)　基因重組和蛋白表達方法/ 191
一、 基因重組實驗技術/ 192
二、 重組子篩選實驗技術/ 193
三、 蛋白表達和純化技術/ 195
第三節(jié)　構建轉基因及基因敲除/ 敲入動物/ 198
一、 轉基因及基因敲除/ 敲入的基本方法和原理/ 198
二、 轉基因及基因敲除/ 敲入技術的比較及選擇/ 202
第四節(jié)　醫(yī)學分子生物學中的RNA 實驗技術/ 204
一、 RNA 檢測技術/ 204
二、 RNA 功能分析實驗/ 206
三、 RNA 蛋白質相互作用分析實驗/ 207
第五節(jié)　基因診斷基本技術/ 209
一、 基因診斷的概念/ 209
二、 基因診斷的特點/ 209
三、 基因診斷的常用技術/ 210
四、 基因診斷的應用/ 212
五、 基因診斷的展望與挑戰(zhàn)/ 213
六、 小結/ 214
第六節(jié)　基因治療基本技術/ 214
一、 基因治療的概念/ 214
二、 基因治療的特點/ 214
三、 基因治療的常用技術/ 214
四、 基因治療的應用/ 216
五、 基因治療的展望和挑戰(zhàn)/ 217
六、 小結/ 218
第七節(jié)　基因編輯實驗技術/ 218
一、 歸巢核酸內切酶技術/ 218
二、 鋅指核酸酶（ZFN）技術/ 219
三、 類轉錄激活因子效應物核酸酶（TALEN）技術/ 219
四、 CRISPR/Cas9 技術/ 220
第八節(jié)　分子克隆實驗技術中的常用數據庫/ 222
一、 核酸序列數據庫/ 222
二、 蛋白質信息庫相關數據庫/ 223
三、 常用的鏈接資源/ 225
四、 醫(yī)學文獻數據庫/ 225
附：實驗方法舉例/ 227
第六章　免疫學實驗技術/ 230
第一節(jié)　細胞因子生物學活性的檢測/ 230
一、 生物活性檢測法/ 231
二、 免疫學檢測法/ 232
三、 分子生物學方法/ 232
四、 小結/ 233
第二節(jié)　抗原抗體檢測技術/ 233
一、 抗原抗體反應的原理及特點/ 234
二、 經典的抗原抗體反應/ 234
三、 抗原抗體反應在現(xiàn)代生命科學研究中的應用/ 236
第三節(jié)　補體檢測/ 237
一、 血清總補體活性測定/ 237
二、 補體結合試驗/ 238
三、 單個補體成分的測定/ 238
第四節(jié)　抗體的制備及應用/ 239
一、 抗體及抗體生成的免疫學基礎/ 239
二、 抗體制備技術/ 240
三、 抗體制備方法的選擇與抗體的應用/ 244
第五節(jié)　免疫細胞的功能檢測/ 244
一、 T 淋巴細胞功能檢測/ 244
二、 B 淋巴細胞功能檢測/ 246
三、 NK 細胞功能檢測/ 246
四、 單核吞噬細胞功能檢測/ 246
五、 抗原呈遞細胞功能檢測/ 247
第六節(jié)　流式細胞術/ 248
一、 流式細胞儀的原理/ 248
二、 流式細胞儀介紹/ 249
三、 流式細胞術的操作/ 250
四、 流式圖的分析/ 251
五、 流式細胞術在免疫學中的應用/ 252
第七節(jié)　免疫細胞的分離與分選/ 254
一、 分離循環(huán)系統(tǒng)免疫細胞/ 254
二、 分離組織中的免疫細胞/ 255
三、 磁珠分選/ 255
四、 流式分選/ 256
第八節(jié)　免疫學技術及其應用的趨勢和展望/ 258
一、 免疫學技術概論/ 258
二、 幾個重要的現(xiàn)代免疫學技術/ 260
26 | 目　　錄
第七章　微生物學實驗技術/ 265
第一節(jié)　細菌學實驗技術/ 265
一、 細菌形態(tài)學觀察技術/ 265
二、 分離培養(yǎng)技術/ 267
三、 細菌鑒定技術/ 269
四、 抗細菌藥物敏感性實驗技術/ 270
五、 快速診斷技術/ 273
第二節(jié)　醫(yī)學病毒學實驗技術/ 274
一、 常見病毒分離、培養(yǎng)、鑒定與保存/ 274
二、 病毒感染及相關功能檢測/ 276
三、 病毒載體介導的基因轉移/ 279
四、 病毒與宿主相互作用體系的建立/ 282
五、 病毒復制適應性系統(tǒng)的建立/ 284
第三節(jié)　醫(yī)學真菌學實驗技術/ 287
一、 醫(yī)學真菌形態(tài)學觀察/ 287
二、 真菌的分離及常用培養(yǎng)基介紹/ 288
三、 醫(yī)學真菌培養(yǎng)和保存技術/ 289
四、 醫(yī)學真菌的鑒定方法/ 290
五、 抗真菌藥物敏感性試驗/ 293
第四節(jié)　支原體、衣原體、立克次體及螺旋體/ 294
一、 支原體及其相關檢測技術/ 294
二、 衣原體及其相關檢測技術/ 294
三、 立克次體及其相關檢測技術/ 295
四、 螺旋體及其相關檢測技術/ 296
第五節(jié)　動物實驗技術/ 296
一、 實驗動物的選擇標準/ 296
二、 動物接種技術/ 297
三、 動物采血技術/ 298
四、 動物解剖技術/ 298
第六節(jié)　微生物實驗室生物安全/ 298
一、 實驗室風險評估/ 298
二、 實驗室生物安全防護/ 299
三、 微生物感染的防治/ 299
第八章　組織病理學實驗技術/ 303
第一節(jié)　常規(guī)組織病理學技術/ 303
一、 組織和細胞標本的取材/ 303
二、 組織和細胞標本的固定/ 304
三、 組織脫水、透明、浸蠟及包埋/ 305
四、 組織切片/ 306
五、 顯微切割技術/ 307
六、 常用組織切片染色方法/ 307
七、 切片封固和保存/ 312
第二節(jié)　組織細胞抗原檢測/ 312
一、 組織細胞抗原檢測方法概述/ 312
二、 免疫酶組織/ 細胞化學/ 312
三、 免疫熒光組織/ 細胞化學/ 314
四、 親和細胞化學/ 315
五、 免疫金銀細胞化學/ 316
六、 免疫電鏡/ 316
七、 組織襯染和抗原修復/ 317
第三節(jié)　原位核酸檢測/ 318
一、 原位雜交的原理/ 318
二、 探針類型、制備及標記/ 319
三、 組織和細胞標本的制備/ 319
四、 原位雜交過程/ 320
五、 原位雜交技術的進展及應用/ 321
第四節(jié)　原位細胞增殖和凋亡檢測/ 323
一、 原位細胞增殖檢測/ 323
二、 原位細胞凋亡檢測/ 324
第五節(jié)　組織芯片/ 326
一、 組織芯片的概念及原理/ 326
二、 TMA 的制作/ 327
三、 TMA 的優(yōu)勢和局限性/ 328
四、 最新進展和有待解決的問題/ 329
第六節(jié)　圖像分析技術/ 330
一、 數字病理圖像的采集/ 330
二、 數字病理圖像的傳輸/ 331
三、 數字病理圖像的分析/ 331
四、 人工智能與病理診斷/ 333
第九章　藥理學實驗技術/ 336
第一節(jié)　藥物效應動力學研究技術/ 336
一、 藥效學研究的基本概念/ 336
二、 新藥藥效學研究/ 337
三、 藥效學研究的基本方法及技術要求/ 337
第二節(jié)　藥物代謝動力學研究技術/ 339
一、 藥物代謝動力學研究概述/ 339
二、 藥物代謝動力學研究技術/ 340
三、 藥物代謝動力學研究舉例/ 342
第三節(jié)　藥物毒性研究技術/ 343
一、 藥物毒理學概述/ 343
二、 不同系統(tǒng)藥物的毒性研究技術及其特點/ 343
三、 藥物毒理學新技術和新方法/ 346
第四節(jié)　抗感染藥物研究技術/ 347
一、 抗感染藥物概述及分類/ 347
二、 抗感染藥物研究方法/ 347
三、 抗感染藥物研究的安全操作技術/ 351
四、 抗感染藥物研究舉例/ 351
第五節(jié)　心血管系統(tǒng)藥物研究技術/ 352
一、 心血管系統(tǒng)藥物概述/ 352
二、 心血管疾病治療中的藥物分類/ 352
三、 心血管疾病藥物研究的相關技術及特點/ 353
四、 心血管系統(tǒng)藥物研究舉例/ 355
第六節(jié)　神經系統(tǒng)藥物研究技術/ 356
一、 神經系統(tǒng)藥物概述/ 356
二、 神經系統(tǒng)藥物研究的基本思路/ 356
三、 神經系統(tǒng)藥物研究的相關技術及其特點/ 356
四、 常見神經系統(tǒng)藥物研究舉例/ 357
第七節(jié)　內分泌系統(tǒng)藥物研究技術/ 360
一、 內分泌系統(tǒng)藥物概述/ 360
二、 內分泌系統(tǒng)藥物研究的基本思路/ 360
三、 內分泌系統(tǒng)藥物研究的相關指標及其特點/ 360
四、 常見內分泌系統(tǒng)藥物研究舉例/ 363
第八節(jié)　消化系統(tǒng)藥物研究技術/ 364
一、 消化系統(tǒng)藥物概述/ 364
二、 消化系統(tǒng)藥物研究的基本思路/ 365
三、 消化系統(tǒng)藥物研究的相關技術及其
特點/ 365
四、 消化系統(tǒng)藥物研究舉例/ 365
第九節(jié)　抗腫瘤藥物研究技術/ 367
一、 抗腫瘤藥物概述/ 367
二、 抗腫瘤藥物體外研究方法/ 368
三、 抗腫瘤藥物體內研究方法/ 369
四、 腫瘤轉化研究臨床前模型/ 370
第十節(jié)　腫瘤耐藥研究技術/ 373
一、 腫瘤耐藥的概念及機制/ 373
二、 腫瘤耐藥檢測的實驗與原理/ 373
第十章　醫(yī)學組學實驗技術/ 377
第一節(jié)　基因組學/ 377
一、 基因組與基因組學的概念/ 377
二、 基因組學研究的種類和意義/ 377
三、 結構基因組學研究的主要技術方法和原理/ 377
第二節(jié)　轉錄組學/ 381
一、 轉錄組學及轉錄組的概念/ 381
二、 轉錄組學研究的主要技術方法和原理/ 381
第三節(jié)　蛋白質組學/ 384
一、 蛋白質組學的發(fā)源及意義/ 384
二、 蛋白質的鑒定和分析基礎技術/ 384
三、 修飾蛋白質組學/ 386
四、 差異/ 比較蛋白質組學/ 387
五、 靶向蛋白質組學/ 388
第四節(jié)　代謝組學/ 388
一、 代謝組與代謝組學的概念/ 388
二、 代謝組學技術/ 389
三、 代謝組學技術的應用/ 390
四、 挑戰(zhàn)和機遇/ 392
第十一章　生物信息學分析技術/ 394
第一節(jié)　新一代測序技術和個人基因組信息時代/ 394
一、 新一代測序技術/ 394
二、 個人基因組信息時代/ 395
第二節(jié)　基因組數據分析基礎技術/ 396
一、 序列比對/ 396
二、 核酸序列特征挖掘技術基礎/ 398
三、 基因組變異鑒定基礎技術/ 399
第三節(jié)　表觀基因組學分析技術/ 400
一、 表觀基因組學/ 400
二、 DNA 甲基化分析/ 401
三、 染色質免疫共沉淀分析技術/ 403
四、 染色質開放區(qū)域分析技術/ 403
五、 染色體三維結構分析技術/ 404
第四節(jié)　轉錄組數據分析基礎技術/ 404
一、 轉錄組數據的獲取/ 404
二、 原始測序數據處理/ 405
三、 轉錄組定量分析/ 406
四、 轉錄組功能分析/ 407
第五節(jié)　蛋白質組數據分析基礎技術/ 408
一、 蛋白質數據的采集/ 408
二、 蛋白質圖譜的鑒定/ 409
三、 蛋白質定量和差異表達分析/ 410
四、 蛋白質組的功能分析/ 411
第六節(jié)　數據庫和工具網址/ 412
第十二章　干細胞實驗技術/ 415
第一節(jié)　胚胎干細胞的分離與培養(yǎng)技術/ 415
一、 飼養(yǎng)層細胞的制備與復蘇/ 415
二、 人胚胎干細胞的分離與建系/ 416
三、 小鼠胚胎干細胞的分離與建系/ 418
四、 胚胎干細胞的鑒定方法/ 420
第二節(jié)　誘導多能干細胞/ 423
一、 iPS 細胞建立的基本方法/ 423
二、 iPS 技術優(yōu)化/ 424
三、 誘導多能干細胞的方法/ 427
第三節(jié)　干細胞顯微注射技術/ 429
一、 干細胞顯微注射技術概念/ 429
二、 干細胞顯微注射技術的原理/ 429
三、 干細胞顯微注射技術的應用/ 429
四、 干細胞顯微注射技術方法種類及比較/ 430
五、 干細胞顯微注射相關實驗技術/ 430
第四節(jié)　內皮祖細胞/ 432
一、 內皮祖細胞概述/ 432
二、 內皮祖細胞的分離方法/ 435
三、 內皮祖細胞的分類/ 436
第五節(jié)　造血干細胞技術/ 438
一、 造血干細胞和祖細胞的分離/ 438
二、 體外檢測/ 439
三、 體內檢測/ 440
四、 人源化小鼠模型的建立/ 443
第六節(jié)　間充質干細胞技術/ 445
一、 體外BMSC 非克隆群體的建立/ 445
二、 體外BMSC 克隆群體的建立/ 446
三、 BMSC 體外分化/ 447
四、 BMSC 體內分化/ 448
第七節(jié)　腫瘤干細胞研究方法/ 449
一、 腫瘤干細胞的研究歷史及定義/ 449
二、 腫瘤干細胞的研究方法/ 449
第十三章　模式動物與疾病模型/ 456
第一節(jié)　人類疾病動物模型選擇、異種器官
模型與嵌合體/ 456
一、 人類疾病動物模型選擇的基本原則/ 456
二、 異種器官模型與嵌合體/ 460
第二節(jié)　腫瘤動物模型/ 463
一、 腫瘤動物模型的概念/ 463
二、 腫瘤動物模型的分類/ 463
第三節(jié)　重大疾病動物模型/ 468
一、 心血管系統(tǒng)動物模型/ 468
二、 呼吸系統(tǒng)動物模型/ 473
三、 消化系統(tǒng)疾病動物模型/ 477
四、 神經系統(tǒng)疾病動物模型/ 487
五、 免疫性疾病動物模型/ 494
第四節(jié)　代謝性疾病動物模型/ 499
一、 肥胖動物模型/ 499
二、 糖尿病動物模型/ 500
三、 脂肪肝動物模型/ 502
第五節(jié)　發(fā)育學動物模型/ 504
一、 斑馬魚/ 504
二、 非洲爪蟾/ 506
三、 果蠅/ 506
四、 其他發(fā)育學動物模型/ 506
五、 發(fā)育學模型的選擇/ 507
第六節(jié)　小動物成像/ 507
一、 小動物成像概述/ 507
二、 小動物活體成像的應用/ 509
第七節(jié)　參考實驗操作方案/ 510
第十四章　醫(yī)用高分子材料實驗方法/ 511
第一節(jié)　生物醫(yī)用高分子材料的生物
相容性和安全性評價/ 511
一、 高分子材料在生物醫(yī)學領域的應用/ 511
二、 生物相容性和安全性評價/ 512
三、 生物相容性評價展望/ 523
第二節(jié)　人工器官用高分子材料/ 523
一、 人工腎用高分子材料/ 524
二、 人工肺用高分子材料/ 525
三、 人工皮膚用高分子材料/ 526
四、 人工肝用高分子材料/ 527
五、 人工血液用高分子材料/ 527
六、 人工神經用高分子材料/ 527
七、 人工血管用高分子材料/ 528
八、 人工胰用高分子材料/ 528
九、 人工肌腱用高分子材料/ 528
第三節(jié)　醫(yī)療診斷用高分子材料/ 529
一、 診斷用高分子微球/ 529
二、 診斷用生物傳感器/ 535
第四節(jié)　藥物緩控釋用高分子材料/ 537
一、 納米藥物載體材料的特性/ 537
二、 常見環(huán)境響應型納米載藥材料/ 539
三、 常見納米載藥材料的制備方法/ 541
四、 常見納米載藥材料的表征/ 542
第五節(jié)　軟硬組織替代和組織工程用高分子材料/ 542
一、 骨組織工程醫(yī)用高分子材料/ 542
二、 人工血管醫(yī)用高分子材料/ 545
中英文名詞對照索引/ 551