《生物化學(xué)實驗技術(shù)(第二版)》編寫分為兩個部分,生物化學(xué)基本實驗技術(shù)部分和實驗部分。第一部分對基本生化實驗技術(shù)理論進(jìn)行了較詳實的介紹,以期使用者能夠掌握生化實驗的背景和原理,在做實驗的同時使自己的專業(yè)理論水平真正得到提高。第二部分廣泛選取了生化實驗中較為成熟的糖類、脂類、氨基酸和蛋白質(zhì)類、核酸類、酶類、維生素類和代謝類實驗,特別注意編排的實驗內(nèi)容的全面性,共計編排50多個實驗項目,包括基礎(chǔ)性實驗、綜合性實驗和設(shè)計性實驗。附錄部分選擇常用的實驗數(shù)據(jù)、表格供參考學(xué)習(xí)。
第一部分 生物化學(xué)實驗的基本原理和技術(shù)
第一章 生物大分子制備技術(shù)
第一節(jié) 材料的選擇和預(yù)處理
第二節(jié) 細(xì)胞的破碎及細(xì)胞器的分離
第三節(jié) 生物大分子的提取和分離純化
第四節(jié) 樣品的濃縮、保存及純度鑒定
第五節(jié) 生化實驗樣品制備
第二章 離心技術(shù)
第一節(jié) 基本原理
第二節(jié) 離心機(jī)的類型和使用方法
第三節(jié) 常用離心方法
第三章 分光光度技術(shù)
第一部分 生物化學(xué)實驗的基本原理和技術(shù) 第一章 生物大分子制備技術(shù)第一節(jié) 材料的選擇和預(yù)處理
第二節(jié) 細(xì)胞的破碎及細(xì)胞器的分離
第三節(jié) 生物大分子的提取和分離純化
第四節(jié) 樣品的濃縮、保存及純度鑒定
第五節(jié) 生化實驗樣品制備
第二章 離心技術(shù)
第一節(jié) 基本原理
第二節(jié) 離心機(jī)的類型和使用方法
第三節(jié) 常用離心方法
第三章 分光光度技術(shù)
第一節(jié) 基本原理
第二節(jié) 分光光度計的基本結(jié)構(gòu)
第三節(jié) 分光光度技術(shù)的基本應(yīng)用
第四節(jié) 提高測量精確度的方法
第四章 層析技術(shù)
第一節(jié) 層析的基本理論
第二節(jié) 常用的層析技術(shù)介紹
第五章 電泳技術(shù)
第一節(jié) 電泳的基本原理和影響因素
第二節(jié) 常用電泳操作技術(shù)
第三節(jié) 電泳設(shè)備及其應(yīng)用
第二部分 生物化學(xué)實驗
第六章 氨基酸及蛋白質(zhì)類實驗
實驗一 薄層層析法分離氨基酸
實驗二 紙層析法分離氨基酸
實驗三 氨基氮的測定——甲醛滴定法
實驗四 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)
實驗五 蛋白質(zhì)的兩性反應(yīng)和等電點(diǎn)測定
實驗六 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量
實驗七 Folin-酚試劑法測定蛋白質(zhì)含量
實驗八 考馬斯亮藍(lán)染色法測定蛋白質(zhì)含量
實驗九 紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量
實驗十 微量凱氏定氮法測定粗蛋白含量
實驗十一 乙酸纖維素薄膜電泳法分離血清蛋白質(zhì)
實驗十二 聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳法分離蛋白質(zhì)
實驗十三 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量
實驗十四 離子交換柱層析法分離混合氨基酸
實驗十五 酪蛋白的制備
實驗十六 細(xì)胞色素C的制備及測定
實驗十七 血清免疫球蛋白的分離純化及鑒定
第七章 核酸類實驗
實驗十八 動物組織中DNA的提取與含量測定
實驗十九 酵母RNA的提取及鑒定
實驗二十 質(zhì)粒DNA的微量快速提取與鑒定
實驗二十一 PCR基因擴(kuò)增DNA
實驗二十二 DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測
實驗二十三 二苯胺顯色法測定DNA含量
實驗二十四 地衣酚顯色法測定RNA含量
實驗二十五 定磷法測定核酸含量
第八章 酶類實驗
實驗二十六 溫度、pH、激活劑、抑制劑對酶活力的影響
實驗二十七 琥珀酸脫氫酶的作用及其競爭性抑制
實驗二十八 蔗糖酶活力測定
實驗二十九 血清轉(zhuǎn)氨酶活力測定
實驗三十 蛋清溶菌酶的制備及活力測定
實驗三十一 堿性磷酸酶的分離與純化
實驗三十二 淀粉酶的活力及比活力測定
實驗三十三 蛋白酶活力測定
實驗三十四 大蒜超氧化物歧化酶(SOD)的分離提取與活力測定
第九章 維生素類實驗
實驗三十五 維生素C的定量測定——2,6-二氯酚靛酚滴定法
實驗三十六 維生素A的定量測定(比色法)
實驗三十七 維生素B2的定量測定
實驗三十八 維生素B12的定量測定(HPLC法)
第十章 糖類實驗
實驗三十九 糖類性質(zhì)實驗
實驗四十 血糖的定量測定——福林-吳憲法
實驗四十一 總糖和還原糖測定——3,5-二硝基水楊酸法
實驗四十二 肝糖原的提取與鑒定實驗
實驗四十三 果膠的提取
實驗四十四 糖酵解產(chǎn)物乳酸的測定
第十一章 脂類實驗
實驗四十五 粗脂肪的定量測定——索氏抽提法
實驗四十六 卵磷脂的提取及鑒定
實驗四十七 脂肪酸價的測定
實驗四十八 脂肪碘值的測定
第十二章 其它實驗
實驗四十九 水分的測定
實驗五十 血清無機(jī)磷的定量測定
實驗五十一 血清鈣測定(EDTA-Na2滴定法)
實驗五十二 葉綠素含量的測定(分光光度法)
實驗五十三 畜禽肉中己烯雌酚的測定(高效液相色譜法)
實驗五十四 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定食品中磺胺二甲嘧啶殘留
實驗五十五 蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測方法
附錄一、試劑的配制
(一)常用溶液濃度的單位及計算
(二)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定
(三)常用緩沖溶液的配制
二、生物化學(xué)實驗常用參數(shù)
(一)一般化學(xué)試劑的分級
(二)實驗室分析用水規(guī)格
(三)常用酸堿的相對密度和質(zhì)量分?jǐn)?shù)、溶解度的關(guān)系
(四)常見蛋白質(zhì)等電點(diǎn)參考值
(五)元素的相對原子質(zhì)量表
參考文獻(xiàn)
生物化學(xué)是生命科學(xué)領(lǐng)域中最活躍的分支學(xué)科之一,生化技術(shù)是發(fā)展生命科學(xué)各分支學(xué)科和生物工程技術(shù)的重要基礎(chǔ)。工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、衛(wèi)生和環(huán)境科學(xué)的很多研究領(lǐng)域也以生物化學(xué)理論為依據(jù),以其實驗技術(shù)為手段。
課程組承擔(dān)的《生物化學(xué)》課程于2013年成功轉(zhuǎn)型升級為國家級精品資源共享課程(課程網(wǎng)址為:http://www.icourses.cn/coursestatic/course_2289.html),網(wǎng)站資源主要由11個課程基本教學(xué)模塊和1個課程專題講座模塊組成,包含演示文稿、教學(xué)錄像、教學(xué)內(nèi)容、作業(yè)習(xí)題等;拓展資源包括教學(xué)案例、動畫、圖片素材、互動平臺、常見生化中英文詞匯詳解、試題庫等欄目。為進(jìn)一步提高教學(xué)質(zhì)量,提升精品資源共享課程建設(shè),適應(yīng)當(dāng)前社會對專業(yè)人才的需求,特組織修訂了《生物化學(xué)實驗技術(shù)》。
本教材編寫分為兩個部分,生物化學(xué)基本實驗技術(shù)部分和實驗部分。第一部分對基本生化實驗技術(shù)理論進(jìn)行了較詳實的介紹,以期使用者能夠掌握生化實驗的背景和原理,在做實驗的同時使自己的專業(yè)理論水平真正得到提高。第二部分廣泛選取了生化實驗中較為成熟的糖類、脂類、氨基酸和蛋白質(zhì)類、核酸類、酶類、維生素類和代謝類實驗,特別注意編排的實驗內(nèi)容的全面性,共計編排50多個實驗項目,包括基礎(chǔ)性實驗、綜合性實驗和設(shè)計性實驗。附錄部分選擇常用的實驗數(shù)據(jù)、表格供參考學(xué)習(xí)。
本教材可作為高等院校動物科學(xué)、動物醫(yī)學(xué)、食品科學(xué)、發(fā)酵工程、衛(wèi)生檢驗、生物技術(shù)、化工、環(huán)保等專業(yè)的實驗教材,也可供相關(guān)專業(yè)的學(xué)生、教師和科技工作者參考。