定 價:22 元
叢書名:能力培育型生物學基礎(chǔ)課系列實驗教材
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- 作者:劉箭主編
- 出版時間:2015/1/1
- ISBN:9787030429933
- 出 版 社:科學出版社
- 中圖法分類:Q5-33
- 頁碼:108
- 紙張:膠版紙
- 版次:3
- 開本:大32開
生物化學是當今生物科學的主干課程,其實驗應用到現(xiàn)代生物學的很多方面,但生物化學實驗難度大,成本高,要在普通高等院校開設(shè)較多的內(nèi)容,需要一本實用、好用、易用的實驗教材。針對高等師范院校學生的特點,我們收集了一些短小精悍,包含生物化學基本實驗技術(shù)的實驗方案,再經(jīng)過編寫人員的多年反復使用和優(yōu)化,以及經(jīng)本科生幾年的試用后,編撰而成。這些實驗均可以在幾小時內(nèi)完成,實驗的成功率較高,實驗成本適當,特別適合于作為本科生的實驗教材
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第一部分 基礎(chǔ)性實驗
實驗1 氨基酸的分離鑒定——紙層析法
【實驗目的】
1.學習氨基酸紙層析法的基本原理。
2.掌握氨基酸紙層析的操作技術(shù)。
【實驗原理】
紙層析法(paperchromatography)是生物化學上分離、鑒定氨基酸混合物的常用技術(shù),可用于蛋白質(zhì)的氨基酸成分的定性鑒定和定量測定;也是定性或定量測定多肽、核酸堿基、糖、有機酸、維生素、抗生素等物質(zhì)的一種分離分析工具。紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法,其中濾紙纖維素上吸附的水是固定相,展層用的有機溶劑是流動相。在層析時,將樣品點在距濾紙一端約2~3cm 的某一處,該點稱為原點;然后在密閉容器中層析溶劑沿濾紙的一個方向進行展層,這樣混合氨基酸在兩相中不斷分配,由于分配系數(shù)(犓d)不同,結(jié)果它們分布在濾紙的不同位置上。物質(zhì)被分離后在紙層析圖譜上的位置可用比移值(rateofflow,Rf)來表示。所謂Rf,是指在紙層析中,從原點至氨基酸停留點(又稱為層析點)中心的距離(X)與原點至溶劑前沿的距離(Y)的比值(圖1-1):