本書由七個模塊組成:第一模塊為細胞工程的基礎技術,第二模塊為植物組織培養(yǎng)及快速繁殖技術,第三模塊為植物細胞懸浮培養(yǎng)技術,第四模塊為體細胞胚胎發(fā)生,第五模塊為植物原生質(zhì)體的分離與融合,第六模塊為植物細胞生物反應器與細胞次生代謝,第七模塊為動物細胞工程。本書體系完整合理、內(nèi)容成熟新穎,大部分實驗內(nèi)容結合教師的科研成果,力爭圖文并茂、簡明、直觀地勾勒出一些基本原理和方法,便于讀者學習和掌握。
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目錄
前言
1.模塊一 細胞工程的基礎技術 1
1.1 細胞培養(yǎng)實驗室常用儀器及設備 2
1.2 細胞培養(yǎng)用品的清洗、消毒與滅菌 8
1.3 細胞工程實驗報告的書寫 14
2.模塊二 植物組織培養(yǎng)及快速繁殖技術 16
2.1 植物培養(yǎng)基母液的配制與保存 19
2.2 培養(yǎng)基的配制與滅菌 23
2.3 植物外植體消毒、接種及愈傷組織誘導 27
2.4 植物器官分化與植株再生 33
2.5 植物無菌苗的生根培養(yǎng) 36
2.5 植物組培苗的移栽與馴化 39
3.模塊三 植物細胞懸浮培養(yǎng)技術 44
3.1 植物細胞懸浮培養(yǎng)與生長量的測定 45
3.2 植物單細胞的分離 50
3.3 植物單細胞的培養(yǎng) 52
3.4 植物懸浮培養(yǎng)細胞計數(shù)和活力測定 59
3.5 植物懸浮培養(yǎng)細胞的植板率和有絲分裂指數(shù)測定 62
3.5 植物細胞的超低溫保存 65
4.模塊四 植物體細胞胚發(fā)生 68
4.1 植物的體細胞胚發(fā)生 69
4.2 植物體細胞胚植株再生 73
5.模塊五 植物原生質(zhì)體的分離與融合 76
5.1 植物原生質(zhì)體分離與純化 78
5.2 植物原生質(zhì)體活力測定 84
5.3 植物原生質(zhì)體培養(yǎng) 87
5.4 植物原生質(zhì)體融合 90
6.模塊六 植物細胞生物反應器與細胞次生代謝 95
5.1 植物體細胞胚生物反應器大規(guī)模培養(yǎng) 96
5.2 HPLC法檢測植物細胞次生代謝產(chǎn)物含量 99
6.3 植物細胞誘導過程中相關酶活力變化檢測 104
7.模塊七 動物細胞工程 114
7.1 動物細胞培養(yǎng)的基本無菌操作 117
7.2 動物細胞培養(yǎng)基本用液的配制與保存 119
7.3 動物細胞計數(shù)與存活實驗 125
7.4 原代小鼠胚胎成纖維細胞的制備及培養(yǎng) 127
7.5 哺乳動物細胞的傳代培養(yǎng) 131
7.5 動物細胞凍存與復蘇 134
7.7 磷酸鈣沉淀法介導細胞轉(zhuǎn)染 138
7.8 小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng) 141
主要參考文獻 145
附錄 147